2869-83-2 / 健那綠B的制備

概述^[1]

健那綠B（JanusgreenB）是專一性線粒體的活細(xì)胞染料，可使線粒體呈現(xiàn)藍(lán)綠色，而細(xì)胞質(zhì)接近無(wú)色，以在高倍顯微鏡下觀察線粒體分布和形態(tài).經(jīng)過(guò)前期的文獻(xiàn)查閱，發(fā)現(xiàn)關(guān)鍵中間體亞甲基紫3RAX的合成方法沒有文獻(xiàn)報(bào)道，且國(guó)內(nèi)沒有大規(guī)模生產(chǎn)，主要是依賴進(jìn)口.有研究參考苯基吩嗪類化合物的合成方法，結(jié)合制藥工藝路線設(shè)計(jì)中的模擬類推法，設(shè)計(jì)了健那綠B的全合成路線，成功地制備了健那綠B。

應(yīng)用^[1]

健那綠B包含偶氮嗪發(fā)色團(tuán)，作為一種有機(jī)染料可以用作結(jié)構(gòu)的有效探針，生物大分子的功能探針和一些生物過(guò)程的研究模型.近年來(lái)，染料-蛋白質(zhì)相互作用也引起了蛋白質(zhì)化學(xué)和超分子化學(xué)極大的興趣.此外，由于其本身帶有正電荷，健那綠B在電鍍材料方面也逐漸凸現(xiàn)它的應(yīng)用價(jià)值。

制備^[2]

健那綠B制備如下：

1）亞甲基紫3RAX的制備：先將對(duì)苯二胺5g（46.3mmol）和N，N-二乙基苯胺6.9g（46.3mmol）溶于12mL6mol/L鹽酸，滴入200mL醋酸-醋酸鈉緩沖溶液（pH5.1）溶液，再加入重鉻酸鉀16.0g，20℃下，攪拌5h.隨后加入苯胺4.3g（46.3mmol），升溫至100℃，繼續(xù)反應(yīng)4h后，趁熱過(guò)濾，用200mL水洗滌濾餅，合并濾液，減壓濃縮至50mL，鹽析，得到紫色粉末3.8g，純度94.9%（HPLC）.收率29.9%，MS（ESI+）：343［M-Cl］+.

2）健那綠B的合成冰浴下，將亞甲基紫3RAX3g（7.9mmol）溶于20mL6mol/L鹽酸中，緩慢滴加含有0.7g亞硝酸鈉的10mL水溶液.待溶液由紫紅色變?yōu)樯钏{(lán)色后，繼續(xù)攪拌1h.再加入N，N-二甲基苯胺1.0g（7.9mmol）繼續(xù)反應(yīng)8h.減壓至干，殘余物分散于飽和鹽水中，過(guò)濾，濾餅干燥，得到暗綠色固體粉末3.3g，收率82.1%，純度83.3%（HPLC）.MS（ESI+）：476［M-Cl］+.

主要參考資料

[1] CN201210047336.4一種健那綠B的合成工藝

[2] 健那綠B的合成及其中放流程的設(shè)計(jì)