47931-85-1 / 鮭降鈣素的說(shuō)明書

背景及概述^[1][2]

鮭降鈣素在治療骨質(zhì)疏松領(lǐng)域有著舉足輕重的地位。而且鮭降鈣素活性高，臨床使用濃度低，在微克級(jí)，其液體制劑生產(chǎn)中，均勻性矛盾比較突出，實(shí)現(xiàn)所述鮭降鈣素制劑的均勻性對(duì)于其生產(chǎn)有比較突出的實(shí)際意義。

1991年3月，瑞士諾華公司的鮭降鈣素獲得了美國(guó)FDA的批準(zhǔn)，以商品名Miacalcin上市。該品的效用高于人降鈣素20倍，抑制破骨細(xì)胞的活性較天然降鈣素強(qiáng)50倍；多年的臨床應(yīng)用表明，該品治療婦女停經(jīng)后的骨質(zhì)疏松療效較好，不良反應(yīng)輕。1994年，瑞士諾華公司的“密鈣息”在我國(guó)獲得注冊(cè)，其他在我國(guó)獲得注冊(cè)的鮭降鈣素還有意大利Lisapharma公司、丹麥Peptech(Europe)公司的產(chǎn)品。

鮭降鈣素(Salcalcitonin)是由32個(gè)氨基酸組成的多肽類物質(zhì)，是一類具有高度活性的降鈣素。它是顯著地降低高周轉(zhuǎn)性骨病的骨鈣丟失，諸如骨質(zhì)疏松癥、變形性骨病(Paget氏病)、痛性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)不良癥(Sudeck氏病)和惡性骨質(zhì)溶解癥，它對(duì)停經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的軀干骨作用比四肢骨更顯著和對(duì)高周轉(zhuǎn)性骨病更顯著。它能抑制破骨細(xì)胞活性，同時(shí)刺激成骨細(xì)胞形成和活性。

鮭降鈣素也能抑制溶骨作用，從而使病理性長(zhǎng)高的血鈣濃度降低以及通過(guò)減少腎小管再吸收而增加尿鈣、磷和血鈉的排泄；然而血清鈣不會(huì)降至正常范圍以下。降鈣素抑制胃和胰腺的分泌活動(dòng)，但并不影響胃腸蠕動(dòng)。臨床試驗(yàn)證明本品對(duì)某些痛性骨病的病人具有止痛作用。所有的降鈣素結(jié)構(gòu)上相似，具有單鏈、排列不同的32個(gè)氨基酸。氨基酸的排列順序取決于物種。鮭降鈣素對(duì)它的受體結(jié)合部位具有很高的親和力(它的受體結(jié)合部位在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些區(qū)域也已經(jīng)被證明)，具有十分良好的臨床效果并且比合成的哺乳類(包括人)的降鈣素，作用持續(xù)的時(shí)間更長(zhǎng)。

目前，鮭降鈣素臨床上已經(jīng)在使用的劑型有注射劑、鼻用噴霧劑、皮下埋植劑。其中，注射劑有50單位(8.3微克/ml)、100單位(16.7微克/ml)、噴鼻劑有0.2毫克/ml、0.33毫克/ml，藥液濃度低，而且由于鮭降鈣素的非特異性吸附，引起鮭降鈣素液體制劑生產(chǎn)過(guò)程中，藥液均勻性、產(chǎn)品含量均勻度的矛盾相當(dāng)突出。這對(duì)臨床使用也帶來(lái)相當(dāng)風(fēng)險(xiǎn)，濃度高的會(huì)引起副反應(yīng)，濃度低了影響療效。

鮭降鈣素

應(yīng)用^[3]

鮭降鈣素能夠抑制破骨細(xì)胞的活性；抑制骨鹽溶解，阻止骨內(nèi)鈣釋出；改善骨密度，有效緩解疼痛癥狀；降低骨折的危險(xiǎn)性和降低血鈣。因此臨床上主要用于治療老年骨質(zhì)疏松癥，絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，骨折移癌癥高鈣血癥。

不良反應(yīng)

鮭降鈣素的不良反應(yīng)主要有休克、皮疹、惡心、嘔吐、腹瀉、心悸、頭痛、眩暈、耳鳴等，個(gè)別可導(dǎo)致心動(dòng)過(guò)速，而引起心絞痛的報(bào)道少見(jiàn)。劉娟報(bào)道了一例鮭降鈣素致心絞痛發(fā)作。建議臨床應(yīng)用此藥物時(shí)，首次注射劑量最好減半，門診患者用藥后不要急于離開(kāi)，觀察一段時(shí)間，一旦發(fā)現(xiàn)異常，應(yīng)及時(shí)予以處理。本藥有引起休克的可能，故對(duì)有過(guò)敏史的患者，應(yīng)詳細(xì)問(wèn)診，注意觀察，若出現(xiàn)癥狀，應(yīng)停藥并給予適當(dāng)處置。臨床試驗(yàn)表明:鮭降鈣素噴鼻劑與鮭降鈣素注射劑一樣能明顯緩解骨質(zhì)疏松相關(guān)的疼痛，抑制體內(nèi)的破骨活動(dòng)，前者不良反應(yīng)的發(fā)生率明顯低于注射劑，并有良好的順應(yīng)性。

純化^[2]

1.在鮭降鈣素氧化液中加入少許乙腈超聲至液體澄清，用孔徑為0.45um濾膜過(guò)濾后備用。

2.純化

純化條件：色譜柱為C8反相硅膠柱，直徑和長(zhǎng)度為：5cm×25cm，流動(dòng)相：A相：體積百分比0.1%甲酸水溶液；B相：體積百分比0.1%甲酸乙腈溶液。流速：60-80mL/min。檢測(cè)波長(zhǎng)：205nm。梯度：B%：體積濃度梯度10-50%，30-50min。進(jìn)樣量為2.5-4g。

純化過(guò)程：用體積濃度10%的B相平衡色譜柱，上樣量為0.5-1.5L樣品溶液。線性梯度洗脫收集目標(biāo)峰，將收集好的肽溶液放置備用。

3．轉(zhuǎn)鹽

用體積濃度60%以上的去離子水沖洗C18反相硅膠柱至流出液為中性，以體積百分比0.3%醋酸鹽水溶液和色譜純乙腈溶液平衡色譜柱，上樣已收集好的目標(biāo)峰溶液。線性梯度洗脫：10-30min，體積濃度梯度90-95%的醋酸鹽水溶液；30-90min，體積濃度梯度30-90%的乙腈溶液，收集全部的目標(biāo)峰。

4．將收集的溶液進(jìn)行減壓濃縮至1g/50mL，濃縮溫度不超過(guò)37℃,然后冷凍干燥得純度大于99.0%的鮭降鈣素，收率32.3%。

主要參考資料

[1]楊惠光, 唐天駟, 李忠澤, & 姚勤紅. (2008). 鮭魚降鈣素治療老年骨質(zhì)疏松癥的臨床研究. 中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志, 14(10), 751-753.

[2] 鄔紅, 楊拯, 咼金海, 邱有波, 張曉, & 陳兵. (2011). 鮭魚降鈣素聯(lián)合基礎(chǔ)藥物治療老年骨質(zhì)疏松療效的匯總分析. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 31(2), 217-219.

[3] 杜瑞琴, 詹志偉, 胡肇衡, 鄭紀(jì)紅, 唐小穗, & 王麗, et al. (2005). 鮭魚降鈣素(考克)治療骨質(zhì)疏松性骨痛的療效評(píng)價(jià). 中國(guó)新藥雜志, 14(10), 1221-1224.