554-68-7 / 鹽酸辛弗林

【背景及概述】^[1][2][3]

生物堿（alkaloids）一般是指存在于植物中的堿性含氮化合物，大多數(shù)具有含氮雜環(huán)，有旋光性和明顯的生理效應(yīng)。大量研究發(fā)現(xiàn)，在蕓香科柑桔屬植物中存在生物堿類化合物，主要有羥苯乙醇胺（octopamine）、辛弗林（synephrine）、酪胺（tyramine）、N-甲基酪胺（N-methyltyramine）、大麥芽堿（hordenine）等苯乙胺生物堿（phenethylamine alkaloids）。

辛弗林別名1-(4-羥基苯基)-2-(甲基氨基)乙醇；辛佛寧；辛福林堿；對羥福林；交感醇；昔奈福林；辛內(nèi)弗林；1-對羥苯基-2-甲氨基乙醇；脫氧腎上腺素；對羥-Α-甲胺甲芐醇；辛弗寧；枳實提取物，辛弗林屬于生物堿中的麻黃堿類，分子結(jié)構(gòu)中同時含有酚羥基和氨基，因此辛弗林具有兩性性質(zhì)，與酸堿均能結(jié)合成鹽。游離的辛弗林易溶于有機溶劑，難溶于水；其酸式鹽和堿式鹽則易溶于水，難溶于有機溶劑。辛弗林已收載于北歐三國藥典和德國藥典。目前認為，其為腎上腺素α-受體興奮劑。辛弗林有收縮血管、產(chǎn)生升高血壓的作用。辛弗林有較強的擴張氣管和支氣管的作用。麻醉貓靜脈注射可完全對抗組織胺所引起的支氣管收縮，對豚鼠離體氣管亦有同樣作用。鹽酸辛弗林臨床用于治療支氣管哮喘及手術(shù)和麻醉時低血壓、虛脫及休克、體位性低血壓等。辛弗林是21世紀天然興奮劑，無任何副作用和陽性反應(yīng)，廣泛用于醫(yī)藥、食品、飲料等保健行業(yè)，隨著化學合成藥物的禁用，辛弗林的需求量和價值將會倍增。L-辛弗林存在于酸橙和柑橘的干燥幼果枳實、青皮等植物中，含量僅為0.28-2.53％。目前，市售的L-辛弗林產(chǎn)品純度低，雜質(zhì)多，不能應(yīng)用于醫(yī)藥等高附加值領(lǐng)域。因此，研發(fā)出制備高純度L-辛弗林成為本領(lǐng)域的關(guān)鍵。

【藥理作用及應(yīng)用】^[3][4]

鹽酸辛弗林可用作升壓藥，用于休克，用于心衰，治療支氣管哮喘及手術(shù)和麻醉時底血壓，虛脫及休克，體、位低血壓等；α-腎上腺素受體激動劑，血管收縮劑等。

1. 對心血管的作用

枳實、枳殼煎劑、枳實提取物、枳實注射液及其有效成分的鹽酸辛弗林靜脈注射，能顯著增強麻醉犬的多種心肌收縮性和泵血功能的指標，具有強心、收縮血管、提高總外周阻力，而使左心室壓力和動脈血壓上升的作用。現(xiàn)代研究又證實枳實可濃度依賴性地提高兔主動脈張力，使主動脈平滑肌收縮。

2. 對減肥的作用

鹽酸辛弗林作為減肥促進劑，其作用機理是刺激β-3腎上腺素受體而發(fā)生脂質(zhì)分解以及隨后產(chǎn)生的生熱作用。大多數(shù)含有鹽酸辛弗林的膳食補充劑中還含有其他不同成分，主要是咖啡因、水楊酸和麻黃堿。上述多種化學成分聯(lián)合作用能夠提高鹽酸辛弗林的減肥功效。以大鼠為研究對象，重復口服市售鹽酸辛弗林含量標準化的酸橙水醇提取物，評價其食物攝取和心血管功能，發(fā)現(xiàn)酸橙提取物能夠降低食物攝取量和體重增加，實驗組動物的心電圖出現(xiàn)異常。

3. 對血壓的影響

藥理學中鹽酸辛弗林被用作去充血劑，通過口服形式治療低血壓。以10個健康成年人為對象，研究含有酸橙提取物的膳食補充劑對血流動力學的影響，證明一些膳食補充劑能夠提高健康、血壓正常的受試者的血壓和心血管興奮作用，可能是在多組分的配方與咖啡因和其他興奮劑協(xié)同所導致。動物實驗研究已表明，鹽酸辛弗林和酸橙提取物提高血壓。連續(xù)六周服用酸橙提取物（6%鹽酸辛弗林）和8盎司的果汁（包含大約13～14mg鹽酸辛弗林），發(fā)現(xiàn)受試者的血壓未產(chǎn)生任何顯著影響，評價鹽酸辛弗林對血壓的影響可能需要更長的研究周期。也有文獻報道辛弗具有顯著的升壓效應(yīng)，加強心肌收縮力，減慢心率和增加心輸出量，增加冠脈流量，增加腎血流量等。

4. 對糖尿病的作用

枳實提取物對實驗性糖尿病小鼠肝臟抗氧化防御功能的影響，用高、中、低劑量的枳實提取物對糖尿病小鼠進行灌胃治療，觀察肝臟的抗氧化能力及肝臟的組織形態(tài)學變化。枳實提取物治療組與糖尿病模型組相比較，血糖水平顯著降低，谷胱甘肽含量顯著增加，谷胱甘肽過氧化物酶活性，丙二醛及氮氧化物含量顯著降低，超過氧化物歧化酶活性增加。光鏡下，枳實提取物治療組肝臟組織細胞損傷較糖尿病組降低，說明枳實提取物具有增強肝臟的抗氧化能力，降低肝細胞損傷的作用。

5. 對支氣管的作用

通過麻醉貓，靜脈注射鹽酸辛弗林可完全對抗組胺所引起的支氣管收縮；其對豚鼠離體器官亦有同樣作用。

6. 對抑郁癥的作用

有學者通過建立小鼠尾懸掛實驗和小鼠強迫游泳實驗抑郁模型，對p-鹽酸辛弗林的抗抑郁作用進行研究，以不動的失望時間為指標，灌胃劑量1～10mg/kg（0.5mL/25g體重），顯著降低其不動時間。精神振奮藥物可以降低不動時間，但是刺激自主活動，p-鹽酸辛弗林灌胃劑量0.3～10mg/kg，發(fā)現(xiàn)小鼠的開野實驗中自主活動未發(fā)生顯著變化排除了是p-鹽酸辛弗林的精神興奮作用。p-鹽酸辛弗林在行為絕望動物抑郁模型上有明顯抗抑郁作用，可以對抗其失望行為，使得絕望行為（不動時間）降低，可能與刺激α-1腎上腺素受體有關(guān)。可能對于低血壓患者的抗抑郁作用有治療作用。

【副作用】^[3]

由于鹽酸辛弗林對腎上腺素刺激作用，所以患有嚴重高血壓、快速性心律失常、窄角青光眼和單胺氧化酶抑制劑接受者的病人應(yīng)避免給食用枳實提取物。鹽酸辛弗林可以造成周期性偏頭痛和原發(fā)性頭痛。文獻研究表明，含有鹽酸辛弗林的膳食補充劑中同時含有其他如甲基黃嘌呤、麻黃堿、?；撬?。甲基黃嘌呤毒性表現(xiàn)在引起顫抖，心跳過速，癲癇發(fā)作。對中樞神經(jīng)有刺激作用的麻黃堿會造成的副作用有心力衰竭，中風，伴隨此類物質(zhì)的存在，會增加產(chǎn)品的副作用造成健康威脅。但在大多數(shù)含有酸橙提取物膳食補充劑中，p-鹽酸辛弗林和其他草藥成分包括咖啡因等共同存在。因此，難以評估其單獨存在的副作用。以白化病小鼠為研究對象，通過自發(fā)運動實驗，體溫效應(yīng)等評價酸橙提取物和p-鹽酸辛弗林的急性毒性。飼喂劑量1000～5000mg/kg酸橙提取物（2.5% p-鹽酸辛弗林），15min后，自發(fā)運動活性明顯降低，p-鹽酸辛弗林（150～2000mg/kg）15min，出現(xiàn)毛發(fā)直立，喘氣，流涎等明顯癥狀，自發(fā)運動活性降低，上述癥狀持續(xù)3～4h，均是可逆的。離體器官的尸檢沒有出現(xiàn)異常。觀測到的毒性作用和相應(yīng)的腎上腺素刺激有關(guān)， p-鹽酸辛弗林不僅作用于β3-腎上腺素受體，而且作用于β2-腎上腺素受體和α1-腎上腺素受體。

【制備】^[1][2]

辛弗林既可化學合成又可從植物中提取，化學合成的路線有氨基乙氰法和直接酰化法，獲得的產(chǎn)物為DL-外消旋體，由于D-對映體可能存在副作用且難以分離，致使化學合成L-辛 弗林受到嚴重制約。因而，從植物中提取分離成為制備L-辛弗林的唯一方法。

方法1：一種從柑橘皮中提取辛弗林的方法，該方法包括步驟：

1）制備辛弗林粗提物：取柑橘皮渣，用乙醇水溶液提取得到辛弗林粗提物；

2）初步純化：將辛弗林粗提物用乙酸乙酯萃取后，使用HP20樹脂進行柱層析；

3）精制：將步驟2）得到的初步純化的辛弗林用XAD18樹脂進行柱層析，并通過HPLC 檢測，將辛弗林純度大于95％的洗脫液混合，冷凍干燥得白色粉末狀物質(zhì)即為辛弗林。

方法2：一種制備高純度L-辛弗林的方法，以市售枳實為原料，經(jīng)溶解及抽濾、超濾除糖和蛋白質(zhì)、大孔吸附樹脂脫色、乙醇除寡糖、反滲透膜濃縮、冷凍干 燥，制得L-辛弗林粉末。其具體的方法步驟如下：

1）制備L-辛弗林原料液：以市售枳實為原料，用粉碎機粉碎后過20目的篩網(wǎng)，未過篩網(wǎng)的顆粒進行下一批次的粉碎，過篩網(wǎng)的粉末進行提取L-辛弗林操作。按枳實粉末質(zhì)量：0.05～0.1mol/L鹽酸溶液體積之比為1kg∶8～10L的比例，將枳實粉末分散在0.05～0.1mol/L的鹽酸水溶液中，先浸泡1～2h后， 再攪拌3～5h，進行第一次提取，接著將提取物在6000～8000r/min的條件下進行第一次離心分離10～20min，分別收集第一次離心分離上清液和沉淀；對收集的第一次離心分離沉淀，按枳實粉末質(zhì)量：0.05～0.1mol/L鹽酸溶液體積之比為1kg∶4～6L的比例，先將第一次離心沉淀分散于0.05～0.1mol/L鹽酸水溶液中，再攪拌3～5h，進行第二次提取，接著將第二次提取物在6000～8000r/min的條件下進行第二次離心分離10～20min，分別收集第二次離心分離的上清液和沉 淀。對收集的第二次離心分離沉淀，用于進一步提取橙皮苷、新橙皮苷和柚皮苷；對收集的 第二次離心分離上清液，與第一次離心分離上清液合并，即為L-辛弗林原料液，用于下步制備L-辛弗林脫糖液。

2）制備L-辛弗林脫糖液：在第1）步完成之后，先將第1）步收集的L-辛弗林原料液泵入超濾器中，用截留分子量為3000～10000Da的超濾膜，在0.05～0.2MPa的壓力下進行超濾分離。分別收集濾過液和 截留液，對收集的截留液，主要含有大分子糖類和蛋白質(zhì)，用作發(fā)酵食用菌的添加劑；對于收集的濾過液，即為L-辛弗林脫糖液，用于下步制備L-辛弗林脫色液。

3）制備L-辛弗林脫色液：取已活化的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂濕法裝柱，按照大孔吸附樹脂體積：第2）步制備出的L-辛弗林脫糖液體積的比為1L∶5～15L的比例，將第2）步制備出的L-辛弗林脫糖液泵入裝有D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂的層析柱中，控制L-辛弗林脫糖液泵入流速為D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂 體積的1～5倍/小時，進行脫色處理。處理完成后分別收集吸附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱和流出的柱后液；對收集的吸附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，先用3～5倍樹脂體積的蒸餾水沖洗。分別收集水洗液和洗滌后的吸附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱；對收集的水洗液，與流出的柱后液合并，即為L-辛弗林脫色液，用于下步制備L-辛弗林脫寡糖液；對收集的水洗后的吸附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，用pH為 9.5～10.5、乙醇濃度為30％～60％的水溶液洗脫，洗脫液流速為1～5倍樹脂體積/小時。分別收集洗脫液和脫附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，對收集的洗脫液，含大量黃色素，用于減壓濃縮回收乙醇并制備黃色素；對收集的脫附色素的 D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，用3～5倍樹脂體積的蒸餾水沖洗，分別收集水洗液和水洗后的脫附色素的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，對收集的水洗液，泵入水處理池進行生化處理，達標后排放；對收集的水洗后脫附色素的的 D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂柱，可用于下批次吸附色素處理。

4）制備L-辛弗林脫寡糖液：在第3）步完成之后，按第3）步制備出的L-辛弗林脫色液體積：95％乙醇體積比為 1L∶1～3L的比例，向脫色液中加入95％乙醇，攪拌10～30min后靜置2～4h，過濾并收集濾液和濾渣。對收集的濾渣，用于制備高純度寡糖；對收集的濾液，在40～55℃、真空度為-0.06MPa ～-0.09MPa的條件下，進行真空減壓濃縮。分別收集真空減壓濃縮液和冷凝液，對收集的冷 液，主要含乙醇，調(diào)配成乙醇濃度為30％～60％的洗脫水溶液，用于下批次洗脫黃色素；對收集的濃縮液，即為L-辛弗林脫寡糖液，用于下步制備L-辛弗林反滲透濃縮液。

5）制備L-辛弗林反滲透濃縮液：第4）步完成后，先將第4）步收集的L-辛弗林脫寡糖液泵入反滲透器中，在0.2～0.6MPa 的壓力下進行反滲透濃縮。分別收集反滲透濾過液及截留液，對收集的濾過液，調(diào)節(jié)酸度后用于從下一批次的枳實粉中提取L-辛弗林；對收集的截留液，即L-辛弗林反滲透濃縮液，用于下步制備L-辛弗林凍干粉。

6）制備L-辛弗林凍干粉：第5）步完成之后，先將第5）步制備的L-辛弗林反滲透濃縮液在-10～-30℃下，預凍3～5小時，再置于冷凍干燥機中，在真空度為20～60Pa、溫度為-40～-60℃的條件下，冷凍干燥24～30小時，就制備出L-辛弗林凍干粉。

7）樹脂的再生：將用了10～15次后的D3520、或X-5、或NKA-12、或NKA-9大孔吸附樹脂，用蒸餾水 沖洗至流出液清澈不渾濁；再依次用2～3倍樹脂體積的95％乙醇、蒸餾水、5％HCl、蒸餾水、5％NaOH浸泡攪拌2h，最后用蒸餾水洗至中性，備用。

【主要參考資料】

[1] 王林婧.一種提取辛弗林的方法. CN201410647518.4，申請日2014-11-14

[2] 顏李秀；周小華；莫卓群；馮琳；萬玉萍.一種制備高純度L-辛弗林的方法. CN201310305483.1，申請日2013-07-13

[3] 張文娟, 陶緣, 王亞軍, 等. 柑橘屬中生物堿辛弗林生理活性的研究進展[D]. , 2013.

[4] https：//db.yaozh.com/hhw/content?cas=94-07-5