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全球數(shù)百萬人正遭受類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和炎癥性腸病等慢性炎癥疾病的折磨。TNF-α,一種關(guān)鍵的促炎細(xì)胞因子,在這些疾病的發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色。TNF-α主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,通過與其細(xì)胞表面受體結(jié)合,啟動(dòng)和放大炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)。因此,準(zhǔn)確檢測(cè)TNF-α的含量對(duì)于疾病診斷、療效評(píng)估以及相關(guān)研究至關(guān)重要。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)憑借其高靈敏度和特異性,已成為TNF-α定量檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。高效、可靠的TNF-α定量檢測(cè)方法對(duì)于相關(guān)研究和疾病診療至關(guān)重要。本文將重點(diǎn)介紹TNF-α ELISA試劑盒,幫助您深入了解其原理、優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用。
ELISA試劑盒在國內(nèi)有多種叫法,例如酶聯(lián)免疫試劑盒、ELISA檢測(cè)試劑盒等。ELISA試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù),基于抗原抗體特異性結(jié)合的原理,主要用于檢測(cè)樣本中的特定抗原或抗體。TNF-α是一種促炎細(xì)胞因子,通常采用雙抗體夾心法進(jìn)行檢測(cè)。雙抗體夾心法需要兩種針對(duì)不同抗原表位的抗體,一種包被在微孔板上用于捕獲抗原,另一種偶聯(lián)HRP用于檢測(cè)結(jié)合的抗原。將標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品分別加入到預(yù)先包被TNF-α捕獲抗體的微孔中,然后加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,加入終止液后轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中TNF-α的濃度呈正相關(guān)。通常在450nm波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。
名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
微孔酶標(biāo)板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
標(biāo)準(zhǔn)品 | 0.3mL*6 管 | 0.3mL*6 管 | 無 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 無 |
檢測(cè)抗體-HRP | 10mL | 5mL | 無 |
20×洗滌緩沖 液 | 25mL | 15mL | 按說明書進(jìn)行稀釋 |
底物 A | 6mL | 3mL | 3mL |
底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
自封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) | 無 |
能夠檢測(cè)極低濃度的TNF-α,提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。適用于多種生物樣本(如血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等)。
采用高質(zhì)量的單克隆或多克隆抗體,確保與TNF-α特異性結(jié)合,降低交叉反應(yīng)。
試劑盒中的預(yù)包被板和標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)過優(yōu)化,具有較長(zhǎng)的有效期和較好的批間穩(wěn)定性。
預(yù)包被96孔板,減少實(shí)驗(yàn)步驟,提高實(shí)驗(yàn)效率。經(jīng)過優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件,使實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好,降低誤差。
經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,確保不同批次之間數(shù)據(jù)的可比性,減少實(shí)驗(yàn)誤差。