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ELISA是“酶聯(lián)免疫吸附試驗”的縮寫,它經(jīng)常用于生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)。elisa用于檢測存在于各種不同類型樣本中的蛋白質(zhì)、抗體、激素和肽分子,也是醫(yī)學(xué)篩查和評估人體在接觸各種目標分子后釋放的大量生物標記物的基本工具。如今,各式各樣的ELISA檢測試劑盒因其操作簡單、高通量、成本相對較低等優(yōu)勢,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,深受科研人員和醫(yī)務(wù)工作者的青睞。
ELISA是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的檢測方法。通過將抗原或抗體固定在微量滴定板表面,依次加入與目標分子結(jié)合的抗體(檢測抗體)及可檢測分子(如酶或熒光團),最終通過顯色或熒光信號進行定性或定量分析。ELISA基于抗體通過高度敏感和特異性的抗體-抗原相互作用檢測目標抗原的原理。當(dāng)抗體和抗原不相互反應(yīng)時,會產(chǎn)生陰性結(jié)果。
與其它免疫測定法相比,酶聯(lián)免疫試劑盒具有顯著優(yōu)勢:
1、簡單易操作
2、高靈敏度
3、高吞吐量
4、定量
5、無需放射性物質(zhì)
6、快速產(chǎn)生結(jié)果
7、價格便宜,方便
在生物學(xué)研究中,通常用ELISA檢測各種抗體、激素和生物標記。可以分析目標,還可以測試許多不同的樣本和物種組合。ELISA試劑盒易于使用,通常使用科研及臨床醫(yī)學(xué)實驗室使用。
Elisa試劑盒使用較為廣泛,如科學(xué)研究、臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境和食品及獸醫(yī)診斷等。下面是常見生物診斷標標志:
1、內(nèi)分泌學(xué)(甲狀腺功能、腎臟病、糖尿病、骨骼和礦物質(zhì)代謝、生育)
2、免疫學(xué)和細胞因子(細胞凋亡、基質(zhì)金屬蛋白酶、細胞粘附分子、趨化因子、白細胞介素)
3、自身免疫
4、腫瘤標志物
5、傳染?。毦?、真菌、病毒、寄生蟲)
6、心臟標志物
7、食物不耐癥與安全
8、生物胺
9、獸醫(yī)診斷
Elisa還可以用于檢測和識別各種生物(人類、小鼠、大鼠、狗、兔子、馬、牛、豬和猴子)的化合物的實驗研究。
Elisa作為免疫檢測工具,具有很多優(yōu)勢。然而,如果正確使用ELISA試劑盒檢測,則必須準確、精確地使用試劑盒檢測技術(shù)。否則,會影響結(jié)果的可靠性以及ELISA試劑盒作為科學(xué)診斷工具的成功率。
ELISA試劑盒作為一種檢測工具,使用起來非常簡單。要使用ELISA檢測,您需要有樣本(通常是血液、尿液或唾液)。樣本被送到實驗室進行檢測和分析。在實驗室中,實驗室技術(shù)人員會將樣本放入微量滴定板中,該微量滴定板還含有與所檢測疾病相關(guān)的特定抗原。如果樣本確實含有針對抗原的抗體,那么抗體和抗原就會結(jié)合在一起。實驗室技術(shù)人員會通過在微量滴定板中添加特定酶進行進一步檢查和測試,并分析和觀察抗原和樣本如何反應(yīng)。
使用ELISA試劑盒的主要優(yōu)點之一是它可以測試和篩選各種樣本類型,包括:
1、細胞提取物
2、組織提取物
3、腦脊液
4、血清
5、等離子體
7、細胞培養(yǎng)
8、唾液
9、尿
10、各種其他生物體液
在開始檢測之前,選擇正確的ELISA試劑盒非常重要。ELISA主要有4種類型:
1、間接ELISA
2、直接ELISA
3、競爭性ELISA
4、夾心ELISA
根據(jù)您進行的測試類型,每種ELISA程序都有不同的質(zhì)量和適用性。
間接ELISA是一種特殊的技術(shù),需要兩步過程進行檢測。
當(dāng)使用直接ELISA時,抗原被固定在表面上并使用針對該抗原的特異性抗體進行檢測。
競爭性ELISA又稱為競爭性免疫測定或抑制ELISA。它們通過檢查信號干擾來測量特定抗原的濃度。
夾心ELISA或夾心免疫測定可能是最常用的形式。該技術(shù)需要兩種抗體,通常稱為匹配抗體對。
ELISA檢測中使用的一些常見酶標記物包括:
OPD:又稱鄰苯二胺二氫氯化物
TMB:四甲基聯(lián)苯胺
ABTS:阿齊諾比斯
PNPP:硝基苯基磷酸二鈉鹽
ELISA除了生物學(xué)研究和臨床醫(yī)學(xué)使用之外,還可以用于檢測食品,用于檢測牛奶、堅果和雞蛋等過敏原,并經(jīng)常用于檢測乳糜瀉等。
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