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抗體:一抗和二抗區(qū)別

  抗體也叫“免疫球蛋白,”是免疫系統(tǒng)對(duì)“外來(lái)”物質(zhì)(病毒、細(xì)菌、真菌和寄生蟲(chóng))產(chǎn)生的糖蛋白。每種抗體有針對(duì)特定類型的抗原,它會(huì)與其同源抗原結(jié)合并中和微生物在感染期間產(chǎn)生的毒素??贵w存在于血漿、血清、唾液和淚液等液體中,除此之外,它們約占血漿蛋白質(zhì)的20%??贵w經(jīng)常用來(lái)做實(shí)驗(yàn)研究,接下來(lái)上海紀(jì)寧生物說(shuō)下抗體結(jié)構(gòu)及一二抗區(qū)別介紹。

  抗體的結(jié)構(gòu)

  一抗和二抗具有共同的結(jié)構(gòu)??贵w是Y形分子,由三個(gè)大小大致相等的部分組成。它們由兩條相同的輕鏈和兩條相同的重鏈組成-二硫鍵將兩條重鏈連接在一起,并將每條重鏈與一條輕鏈連接在一起。這些鏈的特定結(jié)構(gòu)和組合使抗體分子能夠同時(shí)與多個(gè)細(xì)胞結(jié)合??贵w分子的不同部分可以與多種抗原以及一些效應(yīng)分子結(jié)合??贵w的可變區(qū)或V區(qū)表示/指Y結(jié)構(gòu)的兩個(gè)臂,該區(qū)域可以與抗原結(jié)合。相反,Y結(jié)構(gòu)的莖稱為恒定區(qū)或C區(qū),它只能與有限數(shù)量的效應(yīng)細(xì)胞和分子結(jié)合。
抗體

  一抗和二抗區(qū)別

  一抗
  可以與特定蛋白質(zhì)或目標(biāo)生物分子結(jié)合的抗體稱為一抗。一抗以動(dòng)物物種(例如大鼠、小鼠、山羊和兔子)為宿主,制成單克隆抗體(mAbs)或多克隆抗體(pAbs)。MAbs或pAbs各有優(yōu)缺點(diǎn),在選擇一抗之前需要考慮這些優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。MAbs是由動(dòng)物的單個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,因此僅針對(duì)抗原的一個(gè)表位。PAbs是由動(dòng)物的多個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,具有針對(duì)抗原的多個(gè)表位的異質(zhì)抗體混合物。MAbs非常適合相同的生產(chǎn)和標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn),并且產(chǎn)生最少或沒(méi)有背景染色。使用mAb時(shí),與不需要的蛋白質(zhì)發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性也會(huì)降低。
  由于多抗可以結(jié)合單一抗原的多個(gè)表位,因此它們能夠識(shí)別抗原的微小變化。它們還能產(chǎn)生更強(qiáng)的抗原檢測(cè)信號(hào)。因此,它們是涉及變性蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)的理想選擇。一抗以不同的粗制和純化形式開(kāi)發(fā)和供應(yīng)。它們可用于檢測(cè)糖尿病、癌癥、阿爾茨海默氏癥和帕金森氏癥的生物標(biāo)志物。
  二抗
  二抗與直接附著于靶抗原的一抗結(jié)合。一抗的V區(qū)與抗原結(jié)合后,標(biāo)記的二抗將其V區(qū)附著于一抗的莖或C區(qū)。利用這種相互作用,二抗可以間接幫助檢測(cè)和純化靶蛋白(抗原)。二抗在標(biāo)記和檢測(cè)方面更靈敏、更靈活,因此,它們可用于流式細(xì)胞術(shù)、蛋白質(zhì)印跡和細(xì)胞成像等一系列應(yīng)用中的一抗比色、化學(xué)發(fā)光和熒光檢測(cè)。
  二抗類型的選擇取決于一抗的類別——免疫球蛋白IgG或IgM、首選標(biāo)記類型和來(lái)源宿主。由于大多數(shù)一抗都是使用少數(shù)宿主物種開(kāi)發(fā)的,并且大多數(shù)一抗屬于IgG類,因此制造商通常會(huì)提供可用于多種不同檢測(cè)程序和系統(tǒng)的即用型二抗。常用的二抗示例有抗兔IgG、抗鼠IgG、抗雞IgG或抗山羊IgG。所選的二抗應(yīng)始終能夠識(shí)別產(chǎn)生一抗的宿主物種,例如,為了檢測(cè)由小鼠產(chǎn)生的一抗,使用抗鼠二抗。特定測(cè)定的最佳二抗還取決于標(biāo)記類型。在ELISA和蛋白質(zhì)印跡中,標(biāo)記通常是化學(xué)發(fā)光、比色或基于熒光的,但在流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光中,僅使用熒光標(biāo)記。對(duì)于所有這些檢測(cè)來(lái)說(shuō),結(jié)合的二抗都是理想的。
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