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ELISA簡稱“酶聯(lián)免疫吸附實驗”是一種免疫測定方法,檢測者可以利用ELISA試劑盒量化樣品中特定目標(biāo)水平。ELISA在多個領(lǐng)域廣泛應(yīng)用,例如生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、食物和環(huán)境科學(xué)檢測等等。ELISA是什么檢測方法?在本文中上海紀(jì)寧生物從以下幾個方面為您詳細(xì)介紹。
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文章開頭介紹ELISA是一種免疫測定方法,它是基于板檢測技術(shù)。ELISA利用特異性抗體(或抗原)捕獲樣品中的目標(biāo)抗原(或抗體),并利用酶和底物的反應(yīng)檢測/定量目標(biāo)分子方法。
根據(jù)抗原抗體組合,該檢測稱為直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA和競爭ELISA。
在直接ELISA法中,將已知抗原以特異性方式直接吸附在酶標(biāo)板上,通過添加酶標(biāo)記抗體,該抗體能特異性結(jié)合在目標(biāo)抗原,然后加入底物,與酶標(biāo)記抗體結(jié)合的酶會催化底物產(chǎn)生顏色或熒光信號,這一信號的強度與抗原的量成正比,從而可以定量分析抗原的濃度。
將已知抗原以特異性方式直接吸附在酶標(biāo)板上,將含有抗體的樣品添加到抗原包被的孔中,以與抗原結(jié)合。然后加入酶標(biāo)二抗特異性結(jié)合一抗,在加入特定的底物,酶標(biāo)記的二抗催化底物產(chǎn)生顏色變化。通過酶標(biāo)儀測量吸光度,從而定量分析樣品中抗原的抗體水平。
間接ELISA之所以多出一個步驟,是因為它利用了二抗來間接標(biāo)記樣品中的一抗,這不僅提高了檢測的靈活性(因為不同的一抗可以共用同一種酶標(biāo)二抗),而且通常能提高檢測的靈敏度,因為它允許更多的抗體參與反應(yīng),從而放大信號。
ELISA夾心法將抗原夾在抗體之間,將一種針對目標(biāo)抗原特定表位的抗體固定在微孔板的表面上,將含有抗原的樣品加入到孔中并清洗以去除游離抗原。然后加入與抗原上另一個表位結(jié)合的酶聯(lián)二抗。將酶特異性底物添加到平板上,酶催化底物產(chǎn)生顏色變化或熒光,這一信號的強度與最初樣本中抗原的量成正比,從而實現(xiàn)抗原的定量檢測。
競爭性ELISA的微孔板會預(yù)先包被與目標(biāo)抗原具有特異性的抗體,樣本中的未標(biāo)記抗原與酶標(biāo)記的已知濃度的抗原(標(biāo)記抗原)同時加入到這些孔中。使兩者競爭與固相上的抗體或抗原結(jié)合位點。加入底物,酶催化底物產(chǎn)生顏色變化。顏色越淺,表明樣本中的抗原濃度越高,因為更多的標(biāo)記抗原被競爭掉。
上述是實驗室常用的ELISA檢測方法,每個檢測方法都有各自特點,具體使用哪種方法要結(jié)合自己的實驗?zāi)繕?biāo)以及樣本檢測。接下來,我們了解下ELISA具體應(yīng)用。
ELISA是一種免疫學(xué)檢測,在基礎(chǔ)科學(xué)研究、臨床研究和診斷中有著廣泛的用途。
生物醫(yī)學(xué)研究:
ELISA是一種有效的技術(shù),不僅在一般的生物醫(yī)學(xué)研究中很有價值,而且可作為診斷工具。它可以檢測出各種類型的極低水平和數(shù)量的生物分子。盡管存在局限性,但ELISA仍然是基礎(chǔ)研究中的重要工具,并在過去幾十年中改變了生物醫(yī)學(xué)研究。
ELISA在生物醫(yī)學(xué)研究中的一些應(yīng)用方式:
蛋白質(zhì)定量: ELISA通常用于定量樣本中特定蛋白質(zhì)的含量。這可以幫助研究人員了解細(xì)胞和組織中蛋白質(zhì)的表達(dá)和調(diào)控。
抗體檢測: ELISA用于檢測和量化生物樣本(如血清或血漿)中的抗體。這有助于了解免疫系統(tǒng)如何對病原體或疫苗作出反應(yīng)。
藥物研發(fā): ELISA可用于篩選大量化合物庫,以確定其與特定蛋白質(zhì)的結(jié)合能力。這有助于識別潛在的候選藥物以供進(jìn)一步開發(fā)。
生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn):生物標(biāo)志物是可用于指示疾病的存在、嚴(yán)重程度或進(jìn)展的分子。這可以幫助科學(xué)家檢測和測量某些生物標(biāo)志物,這些生物標(biāo)志物有可能幫助診斷、監(jiān)測和治療疾病。
臨床診斷:
ELISA是臨床環(huán)境中廣泛使用的診斷工具。它可以檢測血液或其他體液中是否存在特定抗體或抗原,因此可用于診斷多種疾病。該檢測可作為診斷急性感染的替代工具,并且適合在資源有限的環(huán)境中篩查大量樣本?;?/span>ELISA的傳染性血清學(xué)是準(zhǔn)確診斷和預(yù)后最可靠的方法之一。目前已開發(fā)并上市了多種用于檢測傳染性病原體的先進(jìn)檢測方法。
ELISA在臨床診斷中的一些應(yīng)用方式包括:
傳染病診斷: ELISA通常用于診斷由細(xì)菌、病毒和其他病原體引起的傳染病。例如,ELISA可以檢測人體對病原體產(chǎn)生的抗體,表明當(dāng)前或過去的感染。ELISA用于診斷HIV /AIDS、乙型肝炎和丙型肝炎、萊姆病和梅毒等疾病。
過敏測試: ELISA可用于檢測免疫系統(tǒng)對花粉、塵螨或食物等過敏原產(chǎn)生的特定IgE抗體。ELISA可幫助診斷過敏并確定引起癥狀的過敏原。
自身免疫性疾病診斷: ELISA用于檢測免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的攻擊人體自身組織的自身抗體。ELISA可用于診斷狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和多發(fā)性硬化癥等自身免疫性疾病。
癌癥診斷: ELISA可用于檢測腫瘤標(biāo)志物,即癌細(xì)胞產(chǎn)生的物質(zhì),可在血液或其他體液中找到。ELISA可幫助診斷某些類型的癌癥,例如前列腺癌和卵巢癌。
藥物水平監(jiān)測: ELISA可用于監(jiān)測血液中的藥物水平,以確保藥物處于治療水平且無毒性。ELISA還可用于通過測量尿液中的藥物或其代謝物的水平來檢測藥物濫用。
食品安全檢測:
ELISA用于識別食品中存在的過敏原、病原體和其他污染物。這是一種廉價而快速的方法,可用于篩選大量食品樣本以進(jìn)行質(zhì)量控制和安全目的。ELISA也是牛奶、魚、轉(zhuǎn)基因食品、輻照食品或其他可能影響人類健康的危險食品成分(如牛海綿狀腦?。┵|(zhì)量控制的重要技術(shù)。
ELISA用于食品安全檢測的許多不同領(lǐng)域,包括食源性病原體的檢測、食品加工和生產(chǎn)的監(jiān)控以及進(jìn)口食品的篩查。
上述為大家介紹了ELISA及檢測方法,通過上述了解,相信您對ELISA有個認(rèn)識。紀(jì)寧生物為支持大家科研,我們有科研使用ELISA試劑盒,歡迎前來選購!