紀寧生物
果膠甲酯化程度測劑盒測定意義
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注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質運輸?shù)茸饔猛?,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。
測定原理:
果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與 2,4-戊二酮反應顯色,在 412nm 下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在70℃下與濃硫酸反應生成 5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲?;?2-呋喃甲酸與 3,5-二甲基苯酚反應產生有色物質,在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、酶標儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
測定意義:
植物細胞壁中的果膠是植物初生細胞壁的主要成分,除了起結構支撐、物質運輸?shù)茸饔猛?,還具有抵抗逆境的作用。果膠甲酯化程度影響了細胞壁的堅韌程度及其抗性。
測定原理:
果膠甲酯鍵經皂化處理后釋放出甲醇,甲醇與 2,4-戊二酮反應顯色,在 412nm 下測定吸光值;同時半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應生成 5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲?;?2-呋喃甲酸與 3,5-二甲基苯酚反應產生有色物質,在 450nm 下有最大吸光值。以甲醇生成量與半乳糖醛酸含量的比值代表果膠甲酯化程度。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、酶標儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水、硫酸。
計算公式
1.甲醇生成量計算
標曲為 y = 0.0298x + 0.009,R2 = 0.9997;x 為標準品濃度,μmol/mL;y 為吸光值△A1。甲醇生成量(μmol/g鮮重)=(ΔA1-0.009) ÷0.0298÷W×V 樣總
=33.56×(ΔA1-0.009)÷W
2.半乳糖醛酸含量計算
標準曲線為 y = 0.2585x - 0.1746,R2 = 0.9986;x 為標準品濃度,μmol/mL;y 為吸光值△A2。半乳糖醛酸(μmol/g 鮮重)=(ΔA2+0.1746) ÷0.2585÷W×V 樣總
=3.87×(ΔA2+0.1746)÷W
果膠甲酯化程度(%)=甲醇生成量÷半乳糖醛酸含量×100% V 樣總:加入提取液體積,1mL;W,樣本質量,g。
上海紀寧生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的果膠甲酯化程度測劑盒科研試劑和完善的技術服務,滿足生物化學、分子生物學、細胞生物學、免疫學等生物科技實驗需求。