細(xì)胞是大多數(shù)生物體的結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使細(xì)胞在人工環(huán)境下控制的條件下生長(zhǎng)和繁殖的技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的目的一方面進(jìn)行后續(xù)的下游實(shí)驗(yàn)，例如：

•   WB、ELISA等蛋白檢測(cè)
•   DNA、RNA等分子檢測(cè)
•   凋亡、增殖、周期等功能檢測(cè)
•   原代細(xì)胞培養(yǎng)、凍存等細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

  另一方面來(lái)說(shuō)進(jìn)行更深層次的生命科學(xué)研究，并將其應(yīng)用于解決實(shí)際問(wèn)題，例如疾病治療、藥物開(kāi)發(fā)、環(huán)境保護(hù)等。

  細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，細(xì)胞養(yǎng)好了，后續(xù)實(shí)驗(yàn)才能順利進(jìn)行，才能得到可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。今天，本文為大家介紹一下細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)設(shè)備和試劑。

  細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)設(shè)備

  在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，我們會(huì)用到超凈工作臺(tái)和生物安全柜。如果處理的樣品對(duì)人體無(wú)害，且操作過(guò)程不會(huì)產(chǎn)生氣溶膠，可以使用超凈工作臺(tái)；如果處理的樣品對(duì)人體有潛在危害，或操作過(guò)程可能產(chǎn)生氣溶膠，則必須使用生物安全柜。

  圖1超凈工作臺(tái)和生物安全柜（圖片來(lái)源網(wǎng)絡(luò)，如侵權(quán)請(qǐng)聯(lián)系）

  超凈工作臺(tái)/生物安全柜的工作流程：

  其它細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備包括：

  細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑

  1.細(xì)胞培養(yǎng)基

  培養(yǎng)基從生物體內(nèi)取出細(xì)胞或者組織，將放入有利于其生存/或增值人工環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)物培養(yǎng)的介質(zhì)，培養(yǎng)基培養(yǎng)基的作用是為細(xì)胞培養(yǎng)提供生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基分為完全培養(yǎng)基和不完全培養(yǎng)基。

  完全培養(yǎng)基：包含支持細(xì)胞生長(zhǎng)所需的全部成分，即基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清、抗生素等都已添加齊全，可以直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。這也是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基類型。

  不完全培養(yǎng)基：通常只包含基礎(chǔ)培養(yǎng)基和抗生素，不含血清或其他特殊添加劑。這類培養(yǎng)基通常用作配制完全培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，或者在一些特殊實(shí)驗(yàn)中使用，例如需要研究特定生長(zhǎng)因子對(duì)細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)。

  具體細(xì)胞培養(yǎng)基的選擇要結(jié)合細(xì)胞種類和培養(yǎng)條件選擇，如果你不清楚細(xì)胞如何選擇培養(yǎng)基，也歡迎咨詢紀(jì)寧生物，我們可以幫您推薦優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基。

  血清

  血清為細(xì)胞培養(yǎng)提供細(xì)胞生長(zhǎng)因子和激素，促進(jìn)細(xì)胞增殖、分化和存活。血清中的蛋白質(zhì)可以緩沖pH值的變化，并保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷和毒性物質(zhì)的傷害。市面上細(xì)胞培養(yǎng)用的較多是胎牛血清，胎牛血清對(duì)細(xì)胞的有害成分較少。除此之外，新生牛血清，營(yíng)養(yǎng)成分次于胎牛血清，價(jià)格相對(duì)較低。值得注意是血清成分復(fù)雜，批次間差異較大，可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。如果您對(duì)使用血清有疑惑，不知道選擇哪種血清，歡迎咨詢紀(jì)寧生物，我們幫助您推薦合適的血清應(yīng)用您的細(xì)胞培養(yǎng)。

  胰酶

  胰酶是一種蛋白酶，能夠水解蛋白質(zhì)肽鏈中的賴氨酸和精氨酸羧基端肽鍵。細(xì)胞之間的連接蛋白，例如細(xì)胞外基質(zhì)中的纖維連接蛋白、細(xì)胞-細(xì)胞連接蛋白等，都含有這些氨基酸殘基。胰酶通過(guò)水解這些連接蛋白，從而使細(xì)胞彼此分離。

  胰酶在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用：

  1.細(xì)胞傳代：當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)到一定密度時(shí)，需要進(jìn)行傳代以提供更大的生長(zhǎng)空間。

  2.細(xì)胞計(jì)數(shù)：進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)，需要先將細(xì)胞消化成單個(gè)細(xì)胞懸液。

  3.細(xì)胞凍存：細(xì)胞凍存前，通常需要先將細(xì)胞消化下來(lái)，制成細(xì)胞懸液，再加入凍存液進(jìn)行凍存。

  使用胰酶的注意事項(xiàng)：

  1.濃度和作用時(shí)間：胰酶的消化能力較強(qiáng)，使用時(shí)需要控制好濃度和作用時(shí)間，避免過(guò)度消化損傷細(xì)胞。

  2.EDTA的作用：胰酶通常與EDTA(乙二胺四乙酸)聯(lián)用，EDTA可以螯合Ca2+和Mg2+等二價(jià)陽(yáng)離子，這些離子是某些細(xì)胞連接蛋白所必需的，因此EDTA可以增強(qiáng)胰酶的消化效果。

  3.終止消化：消化完成后，需要及時(shí)加入含有血清的培養(yǎng)基或胰酶抑制劑(例如大豆胰酶抑制劑)來(lái)終止胰酶的消化作用，避免細(xì)胞受損。

  抗生素

  細(xì)胞培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，為細(xì)胞生長(zhǎng)提供了優(yōu)渥的條件，但同時(shí)也為細(xì)菌、真菌等微生物提供了滋生的溫床。使用抗生素可以防止細(xì)菌、真菌和其他微生物的污染，保護(hù)細(xì)胞健康生長(zhǎng)。常用的細(xì)胞培養(yǎng)抗生素：

  1.青霉素(Penicillin):抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌效果較好。

  2.鏈霉素(Streptomycin):抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成，對(duì)革蘭氏陰性菌效果較好。

  3.青霉素-鏈霉素雙抗(Penicillin-Streptomycin,P/S):兩者聯(lián)合使用，可以擴(kuò)大抗菌譜，是細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的抗生素組合。

  4.慶大霉素(Gentamicin):廣譜抗生素，對(duì)多種革蘭氏陽(yáng)性和陰性菌有效。

  5.兩性霉素B(AmphotericinB):抗真菌藥物，作用于真菌細(xì)胞膜上的麥角甾醇。

  上述是細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)設(shè)備和試劑介紹，充分了解細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備和試劑的作用，才能在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的舞臺(tái)上“運(yùn)籌帷幄”，讓細(xì)胞乖乖聽(tīng)話！