2.傳代，由于原代培養(yǎng)中各種類型的細(xì)胞?；祀s生長(zhǎng)，傳代時(shí)不同細(xì)胞又不同的消化時(shí)間，因而要根據(jù)需要注意及時(shí)處理。

　　

　　3.對(duì)貼壁細(xì)胞消化后的吹打過程要有序進(jìn)行，要從一邊開始到另一邊結(jié)束，尤其是器皿的四角處， 確保瓶皿底壁各處的細(xì)胞都被吹打脫離。 吹打時(shí)動(dòng)作不宜過猛， 吹出液體的力度要適中，否則會(huì)直接損傷細(xì)胞并產(chǎn)生能傷害細(xì)胞的氣泡。

　　

　　4.對(duì)于貼壁能力較弱，容易脫壁的細(xì)胞，可以不經(jīng)蛋白酶原消化處理和終止消化這兩步，直接對(duì)原代培養(yǎng)物或經(jīng)漂洗后用吸管進(jìn)行吹打使細(xì)胞脫離瓶皿底壁。 這種直接吹大的方法對(duì)生命力旺盛的細(xì)胞如某些腫瘤細(xì)胞較為合適。 高強(qiáng)度機(jī)械吹打易對(duì)細(xì)胞造成傷害較大， 細(xì)胞也常有較大數(shù)量的丟失， 因而絕大部分貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞需消化后才能吹打， 一般不單獨(dú)采用高強(qiáng)度機(jī)械吹打。

　　

　　5.首次傳代時(shí)適當(dāng)增大接種的細(xì)胞密度，使培養(yǎng)的細(xì)胞間盡快發(fā)生相互作用，有利于傳代細(xì)胞的存活。

　　

　　6.傳代數(shù)是指對(duì)培養(yǎng)物傳代的次數(shù)，它不等于細(xì)胞分裂的次數(shù)或細(xì)胞的代數(shù)，而僅代表傳代操作的次數(shù)。

　　

　　7.傳代對(duì)細(xì)胞的影響或傷害程度僅次于將活細(xì)胞從生物體內(nèi)取出并進(jìn)行原代培養(yǎng)的程度。只是因?yàn)閭鞔蟮募?xì)胞生長(zhǎng)并不像剛開始原代培養(yǎng)時(shí)那樣緩慢罷了。

　　

　　8.每經(jīng)過一次傳代，細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境就相應(yīng)發(fā)生一次較大變化。體外生長(zhǎng)的細(xì)胞若處于動(dòng)蕩的生活環(huán)境中， 細(xì)胞的遺傳特性往往容易發(fā)生改變。 經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)的細(xì)胞， 往往容易轉(zhuǎn)化為惡性細(xì)胞。 因此， 傳代對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和性狀會(huì)產(chǎn)生不利影響， 一般情況下要盡可能減少傳代次數(shù)。