一、間接法ELISA

原理：將抗原與固相載體相連結(jié)，形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。加入特異性一抗與固相抗原相結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，加酶標(biāo)二抗。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)二抗結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，加底物顯色。

優(yōu)點：酶標(biāo)二抗可加強信號，提高靈敏度；靈活性更大，同一酶標(biāo)二抗可應(yīng)用于多種不同的一抗；不直標(biāo)一抗，可保留更多的免疫反應(yīng)性；成本更低，使用標(biāo)記抗體更少。

缺點：交叉反應(yīng)幾率升高。

二、競爭法ELISA

原理：競爭法ELISA更為復(fù)雜，通常用于檢測小分子如半抗原、激素、藥物等。樣品中待檢游離抗原與固定于固相載體上的抗原一起競爭相同的有限量抗體，當(dāng)樣品中的游離抗原越多，就可結(jié)合越多的抗體，而固相抗原只能結(jié)合較少的抗體。反之亦然。經(jīng)洗滌去除樣品中的抗原與抗體的結(jié)合物，只留下固相抗原與抗體的結(jié)合物。顯示經(jīng)計算可得樣品中抗原的含量。競爭法可根據(jù)實驗設(shè)置直接法、間接法或夾心法形式。