一、直接ELISA

原理：將抗原與固相載體連接，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。加酶標(biāo)抗體進(jìn)行孵育。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。加底物反應(yīng)。直接法主要用于測(cè)定抗原。

優(yōu)點(diǎn)：操作流程簡(jiǎn)短，實(shí)驗(yàn)步驟少；無需使用二抗，避免了交叉反應(yīng)；實(shí)驗(yàn)步驟少，操作不易出錯(cuò)。

缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)中的一抗需要直接用酶標(biāo)記，成本相對(duì)較高。

二、競(jìng)爭(zhēng)法ELISA

原理：競(jìng)爭(zhēng)法ELISA更為復(fù)雜，通常用于檢測(cè)小分子如半抗原、激素、藥物等。樣品中待檢游離抗原與固定于固相載體上的抗原一起競(jìng)爭(zhēng)相同的有限量抗體，當(dāng)樣品中的游離抗原越多，就可結(jié)合越多的抗體，而固相抗原只能結(jié)合較少的抗體。反之亦然。經(jīng)洗滌去除樣品中的抗原與抗體的結(jié)合物，只留下固相抗原與抗體的結(jié)合物。顯示經(jīng)計(jì)算可得樣品中抗原的含量。競(jìng)爭(zhēng)法可根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置直接法、間接法或夾心法形式。