一、直接ELISA

原理：將抗原與固相載體連接，洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。加酶標(biāo)抗體進(jìn)行孵育。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。加底物反應(yīng)。直接法主要用于測(cè)定抗原。

優(yōu)點(diǎn)：操作流程簡短，實(shí)驗(yàn)步驟少；無需使用二抗，避免了交叉反應(yīng)；實(shí)驗(yàn)步驟少，操作不易出錯(cuò)。

缺點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)中的一抗需要直接用酶標(biāo)記，成本相對(duì)較高。

二、間接法ELISA

原理：將抗原與固相載體相連結(jié)，形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。加入特異性一抗與固相抗原相結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，加酶標(biāo)二抗。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標(biāo)二抗結(jié)合，從而間接地標(biāo)記上酶。洗滌后，加底物顯色。

優(yōu)點(diǎn)：酶標(biāo)二抗可加強(qiáng)信號(hào)，提高靈敏度；靈活性更大，同一酶標(biāo)二抗可應(yīng)用于多種不同的一抗；不直標(biāo)一抗，可保留更多的免疫反應(yīng)性；成本更低，使用標(biāo)記抗體更少。

缺點(diǎn)：交叉反應(yīng)幾率升高。